January 16, 2022

le défi, et l’évaluation de l’infection

 et de la maladie à rhinovirus ont été décrits ailleurs en détail [7]. En bref, des échantillons pour la culture quantitative du nez, du pharynx et de la peau (aisselles, paumes des mains et aine) ont été obtenus de chaque participant par écouvillon. Après le placage de surface et santé l’incubation pendant 24-48 h à 35°C,

le nombre total de colonies et celles

qui avaient des caractéristiques morphologiques compatibles avec S. aureus et CoNS ont été comptés comme unités formant des colonies et évalués par la coloration de Gram, le test de catalase et le test de coagulase (Staphaurex; Murex Biotech) Les cultures d’échantillons d’Air ont été effectuées dans une chambre hermétique de 3,1 m3 (110 pi3) de volume qui a été construite autour de l’avant d’une hotte de sécurité biologique de classe II (Purificateur; Labconco) avec suffisamment d’espace pour qu’un volontaire puisse s’asseoir devant l’établi. Trois échantillonneurs D’Air Andersen à 2 étages et un à 6 étages ont été utilisés pour mesurer les santé

particules santé bactériennes en suspension dans l’air par impact sur des plaques de gélose sanguine (volume de l’échantillon, 28,3 L [1 pi3]/min; Instruments Andersen) [9]. Les géloses ont été incubées pendant 24 h à 35°C, puis maintenue pendant 24 h à température ambiante [10]. Les Colonies ont été dénombrées et évaluées comme décrit ci-dessus. Une colonie de S. aureus et CoNS de chaque site de culture, si disponible, a santé été stockée dans un bouillon de soja tryptique à 95% avec 5% de glycérol à -70°C pour le typage

  • moléculaire Pour tester la santé récupération des isolats de S. aureus dans la chambre d’essai, une solution saline contenant une concentration définie de bactéries de S. aureus a été dispersée dans l’air à l’aide d’un nébuliseur Collison [11]. Des échantillons d’Air ont été prélevés à l’aide des échantillonneurs D’Air Andersen pendant 20 min, et le taux de récupération a été calculé comme la moyenne de 3 passages de chambre indépendants. En moyenne, 8 ufc/m3/min de S. aureus ont dû être dispersés par
  • le nébuliseur pour récupérer 1 ufc de S. aureus Le typage moléculaire de certains isolats de S. aureus a été réalisé à l’aide de L’endonucléase de restriction SmaI suivie d’une électrophorèse sur gel en champ pulsé (PFGE; BioRad) [12]. L’analyse en grappes des motifs de baguage a été utilisée pour déterminer la similitude clonale (Version 3.0 du logiciel BioNumerics; Applied Math). Les souches ont été santé

considérées comme différentes

  • si elles présentaient >3 santé différences de fragments [13]. Les isolats des souches dominantes ont été testés pour la sensibilité à la méthicilline à l’aide du test de diffusion sur disque (1 µg de méthicilline; souche témoin S. aureus ATCC 25923) [14] Conception de l’étudeles cultures d’échantillons d’air bactériens quotidiennes ont été effectuées pendant 16 jours consécutifs, les participants étant assis dans la chambre pendant deux séances de 20 minutes, précédées d’une course de contrôle sans
  • participants. En tout, il y a eu 528 sessions de chambre. Au cours de la première séance, les participants portaient des vêtements stériles (une blouse chirurgicale santé résistante aux fluides [Medline Industries] par-dessus des vêtements de rue, des gants chirurgicaux [Ansell Healthcare Products], des santé

couvre-chaussures [Spunbond Gripper; Medline Industries] santé et une casquette bouffante [Spunbond Sheer-Fit; Medline Industries]). Cela a été suivi d’une séance d’éternuement induite par l’histamine avec de nouveaux vêtements stériles, des gants, des couvre-chaussures, un bonnet bouffant et l’administration d’histamine intranasale (25 mg/mL). Ce dernier a été appliqué sur les narines antérieures avec un coton-tige stérile et distribué en pressant doucement les parois extérieures du nez ensemble [15]. Cette séquence de séances a été répétée tous les 16 jours. Pendant les séances de chambre, le nombre d’éternuements, de toux, de coups de nez, de

conversations et d’activités inhabituelles du participant a été enregistré en observant directement le personnel de l’étude. Il a été demandé aux participants d’éviter les mouvements brusques du corps et d’éternuer ou de tousser en direction du capot de sécurité sans couvrir la zone du visage Les Participants ont été santé exposés après le jour 2 à 1 de 3 sérotypes de rhinovirus (Hanks, 39 ou 16) à une dose intranasale de 100 TC TCID50, sur la base de leur sérosusceptibilité (titres d’anticorps neutralisants sériques 1 1:4 au virus santé

Les mesures de dispersion bactérienne

ont été répétées quotidiennement. santé L’Infection a été déterminée par l’isolement du virus à partir d’échantillons de lavage nasal et par la mesure des titres d’anticorps neutralisants sériques homotypiques sur des échantillons appariés aigus et convalescents (4 semaines). Pour évaluer la maladie, 8 symptômes (éternuements, rhinorrhée, obstruction nasale, maux de gorge ou éraflures, toux, malaise, frilosité et maux de tête) ont été évalués quotidiennement sur une échelle de 0 à 4 [17]. Le score total des symptômes est la somme santé des évaluations individuelles des symptômes. Un rhume était défini comme étant présent si un sujet avait un score total de symptômes de Rhin 6 et une rhinorrhée sur ⩾3 jours et / ou l’impression subjective d’un rhume [17] Analyse des donnéesles analyses de données ont été effectuées à l’aide du logiciel STATA (Version 9.1; StataCorp). Le résultat a été défini comme la dispersion

  • quotidienne de bactéries aéroportées—telles que S. aureus CoNS et d’autres bactéries-au niveau individuel au cours de 16 jours consécutifs, en unités formant des colonies par mètre cube par minute. Les 2 séances d’étude avec ou sans exposition à l’histamine ont servi de variable d’exposition catégorielle. La construction du modèle et les tests ont été basés sur une
  • distribution binomiale négative à effets aléatoires pour les données de comptage surexposées [18, 19]. Les mesures des effets sont exprimées en ratios de taux d’incidence (Tri). santé Cette distribution explique l’hétérogénéité entre les individus dans les taux de bactéries aéroportées, ce qui peut entraîner une surdispersion et un excès de zéros trouvés dans les distributions de résultats. La
  • distribution binomiale négative à effets aléatoires tient également compte du regroupement dû aux observations répétées survenant au sein d’un individu au fil du temps et au cours des sessions La construction du modèle réel était basée sur une stratégie hiérarchique d’élimination rétrograde qui

a réduit le modèle le plus complexe à un modèle final. Les facteurs de risque potentiels influençant l’association des résultats de l’exposition comprenaient les facteurs modifiables exposition au rhinovirus et aux allergies et les facteurs fixes sexe et Âge. La modification de la mesure de l’effet a été évaluée à l’aide du test Wald composite avec un niveau α fixé à .05 et les critères D’information D’Akaike [20] et Schwartz [21] [22]. La technique du changement d’estimation a été choisie pour tester la confusion, avec un seuil prédéfini de 10%. Après le calcul des modèles finaux, des diagnostics de modèle ont été appliqués pour détecter les cas influents potentiels. En raison de la nature groupée de l’ensemble de données, chaque participant a été retiré 1 à la fois des modèles finaux et les effets de changement d’estimation ont été déterminés. Le seuil a été préréglé à un effet de variation de l’estimation de 20% Résultat Participants et mesures de la maladie / infectiondeux femmes et 9 hommes (âge moyen, 24 ans; fourchette, 19–

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